O objetivo do presente estudo foi ampliar a aplicação da metodologia alternativa de pré-condicionamento das sementes para o teste de tetrazólio para novos genótipos de soja. Os tratamentos usados foram: regimes de pré-condicionamento: 4h/41ºC, 6h/41ºC e 16h/25ºC (método convencional); genótipos: BR92-6568, BR92-7303, Embrapa 58, Embrapa 59, Embrapa 60, Embrapa 61, Embrapa 62, BRS 132, BRS 133, BRS 134, BRS 135, BRS 136, BRS 156 e BRS 157; dois tamanhos de sementes: grande e médio. Os parâmetros usados para testar os tratamentos, mediante a técnica de tetrazólio, foram vigor [TZ (1-3)], viabilidade [TZ (1-5)], dano mecânico [TZ (6-8)], deterioração por umidade [TZ (6-8)] e lesão por percevejo [TZ (6-8)]. O regime de pré-condicionamento de 6h/41ºC resultou em condições propícias de coloração das sementes, permitindo excelente avaliação de todos os parâmetros determinados pelo teste de tetrazólio para os 14 genótipos. A nitidez de coloração proporcionada pelo teste de tetrazólio por 6h/41ºC de embebição foi semelhante à obtida com o método tradicional e superior à obtida após 4h/41ºC. O regime de 4h/41ºC não foi adequado para elevar o grau de umidade até 27%, necessário para que as sementes apresentassem um padrão de coloração no teste de tetrazólio que permita a identificação de deterioração por umidade e de danos mecânicos para a maioria dos genótipos. Apenas a determinação de danos de percevejo foi viável nesse tratamento. Este resultado valida a aplicação do método alternativo de pré-condicionamento por 6h/41ºC, possibilitando a sua utilização para a avaliação da qualidade das sementes de soja pelo teste de tetrazólio.