Este trabalho teve como objetivo, verificar o efeito da heterose na qualidade fisiológica de sementes de milho. Sementes de seis linhagens provenientes do programa de melhoramento de milho da Universidade Federal de Lavras, UFLA, e dos seus respectivos híbridos simples e híbridos simples recíprocos foram produzidos na área experimental da UFLA. A avaliação da qualidade fisiológica foi realizada no Laboratório de Análise de Sementes da UFLA, através dos testes de germinação, de vigor e bioquímicos. Os testes realizados para avaliação da qualidade fisiológica seguiram o delineamento inteiramente casualizado com quatro repetições e a comparação das médias foi feita pelo teste de Scott e Knott. Os dados obtidos na avaliação da qualidade fisiológica das sementes das linhagens e híbridos foram utilizados para estimar os valores da heterose. Os resultados permitiram concluir que sementes híbridas de milho apresentam qualidade fisiológica superior quando comparadas à das linhagens, evidenciando a expressão da heterose na qualidade fisiológica de sementes de milho.