O objetivo neste trabalho foi definir uma metodologia de detecção de Sclerotinia sclerotiorumem sementes de feijão e soja por meio da utilização de restritores hídricos, em substituição ao uso de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, em substrato agar sólido contendo azul de bromofenol e antibióticos (Neon-S). Primeiramente, foram avaliados os efeitos dos restritores hídricos manitol, cloreto de sódio e polietilenoglicol, em diferentes potenciais osmóticos, no crescimento
micelial de isolados de Sclerotinia sclerotiorume na protrusão das radículas das sementes em estudo. O emprego de restritores
hídricos com potenciais osmóticos acima de -0.5 MPa para PEG e de -1.0 MPa para manitol e cloreto de sódio não afetou o crescimento micelial dos isolados testados e proporcionou inibição satisfatória da protrusão radicular das sementes em estudo. Na segunda etapa deste trabalho, os regimes alternância de luz e escuro contínuo foram testados na detecção do referido fungo nas sementes em estudo. A metodologia de detecção semi seletiva de S. sclerotiorum com substrato BDA, azul de bromofenol (100ppm), cloranfenicol (50 ppm) e o restritor hídrico manitol (-1.0 MPa), sob temperatura de 20 °C, incubação na ausência de luz, revelou-se mais eficaz e seguro para a detecção do referido patógeno em análises de sanidade de rotina.